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豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒規格

產品簡介

豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒規格
上海聯祖生物相關產品:
GLUT1檢測試劑盒要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍

更新時間:2021-03-13
訪問次數:687
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒規格

 英文名稱

 Porcine Rubulavirus(PoRV) RTPCR

 貨號

 LZP7172

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
2,4-Dimethoxy俾斯麥棕Y Biological stain丹參酮I  分析標準品,≥98%

3-Fluoro2-氯-3-硝基吡啶 >99.0% (HPLC)他克莫司 分析標準品,≥98%

4-Fluoro2-羥基吡啶 97%他克莫司 ≥98% (HPLC)

PHBA桑色素 Indicator3,3’-二沒食子酸酯茶黃素 分析標準品, ≥98.0% (HPLC)

4-Methoxy桑色素 分析標準品,≥98知母皂苷A-Ⅲ 分析標準品,≥97%

2-Nitro2-甲基-3-三氟胺 99%細辛 分析標準品,≥98%

3-Nitro  ≥99.0% (HPLC)四氫巴馬汀 分析標準品,≥98%

4-Nitro酚標準溶液 1000μg/ml,溶劑:甲香蒲新苷 分析標準品,≥98%

Phenylacetaldehyde三酚 植物細胞培養級,>99.0% (HPLC)延齡草苷 分析標準品,≥98%

OPA間,二 99%乙酰蒲公英萜 分析標準品,≥90%

p-Phthalaldehyde苯酸 97%鳶尾黃素 分析標準品,≥97%

Methylglyoxal羅丹明6G Biological stain牡荊素-2-O-鼠李糖苷 分析標準品,≥98%

Undecanal硫酸氧鈦 synthesis grade漢黃芩素 分析標準品,≥99%

3,4-二甲氧基3,4-Dimethoxy硫酸氧鈦 93%葉黃素 分析標準品,90%

Vanillin2-溴-3-羥基吡啶  98%育亨賓 分析標準品,≥98%

Sodium molybdate dihydrate2-氯-3-羥基吡啶 98%4-叔丁基苯甲酸 99%

β-葡聚糖酶Rab25 (D4P6P) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG F(ab')2  兔抗人IgG F(ab')2

2-脫氧-L-胸苷/替比夫定Phospho-ATM (Ser1981) (D25E5) Rabbit mAbRabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG

替比夫定(標準品)SimpleChIP® Human IFN-γ Promoter PrimersRabbit Anti-human IgA  兔抗人免疫球蛋白A

輪環藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環十二烷 STAM1 AntibodyRabbit Anti-horse IgM/RBITC  羅丹明標記的兔抗馬IgM

雷替曲塞DyLight™ 554 PhalloidinRabbit Anti-horse IgM/PE-Cy7  PE-Cy7標記的兔抗馬IgM

L-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽PX-866Rabbit Anti-horse IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗馬IgM

雙嘧達莫DAZL (D2A4) Rabbit mAb (IHC Specific)Rabbit Anti-horse IgM/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗馬IgM

他米巴羅汀SimpleChIP® Mouse ATF-3 Intron 1 PrimersRabbit Anti-horse IgM/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗馬IgM

文多靈VAMP8 AntibodyRabbit Anti-horse IgM/PE  PE標記的兔抗馬IgM

羅丹明B;玫瑰紅BPhospho-α-E-Catenin (Ser652) AntibodyRabbit Anti-horse IgM/HRP  辣根過氧化物酶標記的兔抗馬IgM
豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒規格人髓樣分化因子初次應答基因88(MYD88)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25克

人胎兒血紅蛋白(HBF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT5毫克

人胎盤催乳素(HPL)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT支

人胎盤蛋白(PP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃25毫克

人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人胎盤堿性磷酸酶(PLAP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

人胎盤泌乳素(PL)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25毫克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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