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人遺傳小腦共濟失調PCR檢測試劑盒廠家

產品簡介

身ELISA試劑盒IQGAP1 支架蛋白100 ul

白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒IRF-1 干擾素調節因子1100 ul

白介素7(IL-7)ELISA試劑盒IRAK 白介素-1受體相關激酶1/220 ul

白介素6受體(IL-6R)ELISA試劑盒Phospho-IRAK1 (Ser376)

更新時間:2021-03-13
訪問次數:598
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 人遺傳小腦共濟失調PCR檢測試劑盒廠家

 規格

 50T

 貨號

 LZP7786

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
三標準溶液(100μg/ml,u=5%)Complexin-1 (D5Q5H) Rabbit mAb1-(BROMOPHENYLSULFONYL)PIPERAZINE

三標準溶液(10μg/ml,u=6%)Calponin 1 (D8L2T) XP® Rabbit mAb(1R,2R,5R)-(+)-2-羥基-蒎烷酮

(標準品)Calponin 1 (D8L2T) XP® Rabbit mAb碳酸芐基酯

2,6-二氟甲酸(標準品)PTMScan® Propionyl-Lysine [Prop-K] Kit氨基-5-溴甲鹽酸鹽

Standard for GC,≥99.5%(GC)CD3 (17A2) Rat mAb (APC-Cy7® Conjuga)BROMO-5-(PYRROLIDINOCARBONYL)PYRIDINE

(標準品)EOMES (D8D1R) Rabbit mAb (PE Conjuga)5-氨基-基-1-基-1H-吡唑-甲酸酯

(標準品)RBM10 Antibody2-氟-5-異氧基基酸

十氫萘(標準品)p53 (DO-1) Mouse mAb1-BOC-氨基-2,2-二甲基1,烷二

二二(標準品)Mutant Ras Antibody Sampler Kit靛青三磺酸鹽

二二(Standard for GC,≥99.5%(GC))PathScan® Total Bmi1 Sandwich ELISA Kit氟-(哌啶-1-羰基)基酸

草酸二酯(標準品)RPL11 (D1P5N) Rabbit mAb基甲酰

(標準品)BRCC36 (D5E5H) Rabbit mAbPICOLINE-BORONIC ACID HCL

1,2-二(標準品)Alix (E4T7U) Rabbit mAb-D-氨酸

鄰二甲酸二異壬酯(標準品)Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (D20G3) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)對叔丁基磺酰

4,二溴聯(標準品)Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb酸(1S,2S)-N,N'-雙[(R)-2-羥基-2'-基-1,1'-聯萘基-基亞甲基]-1,2-二基二合錳(III)

1,1-二標準溶液(1mg/ml,基體:甲)Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAb6-氨基-2-萘甲酸甲酯

2,二肼(AR,≥99.0% (HPLC))Nav1.1 (D8X1Y) Rabbit mAb2-甲酰氨基酸

2,二肼(~0.005 M in ethanol,for TLC)HSL (D6W5S) XP® Rabbit mAb溴-2-氧基-5-氟基酸

白三D4(LTD4)ELISA試劑盒Ingrin Alpha V + Beta1  整合素αVβ1100 ul

白三C4(LTC4)ELISA試劑盒Ingrin Alpha V + Beta 3  整合素αVβ31 Kit

白三B4(LTB4)ELISA試劑盒Ingrin Alpha V + Beta 5   整合素αVβ51 Kit

白介素增強子結合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)ELISA試劑盒Ingrin alpha E/CD103  整合素αE100 ul

白介素8(IL-8/CXCL8)自身ELISA試劑盒IQGAP1  支架蛋白100 ul

白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒IRF-1  干擾素調節因子1100 ul

白介素7(IL-7)ELISA試劑盒IRAK  白介素-1受體相關激酶1/220 ul

白介素6受體(IL-6R)ELISA試劑盒Phospho-IRAK1 (Ser376)  酸化白介素-1受體相關激酶1100 ul

白介素6(IL-6)ELISA試劑盒Phospho-IRAK1 (Thr209)  酸化白介素-1受體相關激酶1100 ul
人遺傳小腦共濟失調PCR檢測試劑盒廠家橋粒糖蛋白4抗體Pazopanib中文名:帕唑帕尼別名:分子式:C21H23N7O2S

中間絲蛋白β-synemin抗體Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate中文名:卡培他濱別名:分子式:C16H20FN3O7

MAP激酶激活死亡域蛋白4C抗體Irbesartan中文名:厄貝沙坦別名:分子式:C25H28N6O

腫瘤細胞調亡素/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體Isoniazid中文名:別名:分子式:C6H7N3O

Erdj5/DNAJC10蛋白抗體Decoquinate中文名:癸氧喹酯別名:分子式:C24H355

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